本周的业务学习，免疫室团队分享了一例乙肝五项检测结果假阳性的案例。大家积极参与，认真讨论，得出了一些共识，对于酶免法的优劣势有了深刻的了解。
案例经过患者：全某，男，58岁，来自风湿免疫科，已确诊为类风湿性关节炎。年12月9日，抽血进行传染病筛查。因患者为新农合医保，按照规定，我们对该份标本采用酶免法进行传染病四项检测，首次结果如下。
从上化验结果可知，患者乙肝五项结果为“大三阳”，处于乙型肝炎活动期。免疫室同仁出于工作习惯，采用酶免法进行复查，结果仍然为“大三阳”。后采用电化学发光方法对本份标本再次进行检测。结果竟截然相反，所有指标均为阴性。
从检测技术角度而言，尽管电化学发光检测无论是在灵敏度、特异性方面，均优于酶免法。但是酶免作为极为常用的检测方法，有着相当的准确性。然而，为何此患者两种方法的结果却迥异呢？难道是酶免法检测结果有失精准吗？
为了进一步核实结果到底如何，免疫室同仁把标本送至试剂生产厂家，后者采用PEG及高速离心等方法对标本进行处理后，再次进行检测，结果均为阴性。表明此次检测，酶免法对于此标本的检测存在假阳性问题。
免疫室汇报后，各专业组同仁纷纷提出问题，并进行讨论。
问题一：酶免法是传统的传染病筛查方法，初次及首次复查结果均为“大三阳”，为何想到采用电化学发光技术复查？
免疫室同仁解释，结果复查的原因主要有两点。
1.尽管显示为“大三阳”，但是吸光度值均在临界值左近，这样的区间，容易出现假阳或假阴性结果。
2.患者为活动期类风湿性关节炎，此类患者体内可存在大量的干扰性抗体成分，容易造成结果的假阳性。
问题二：哪些影响因素容易造成酶免法检测结果的异常?
ELISA操作包括试剂和样本准备、加样、温育、洗板、显色和比色等步骤。每个环节的不规范操作均会对测定结果产生影响，此外，患者标本中也可能存在干扰酶免疫测定的内源性和外源性因素。
1.标本的内源性因素如护士采血污染、标本含有类风湿因子（RF）、补体、异嗜性抗体等。
2.临界值的设定偏低ELISA以临界值来判断结果，若OD值处于检测临界值“灰区”时，可能得出假阳/假阴性结果。
3.批量检测标本时，若洗板机有限会造成等待时间延长，继而造成温育时间延长，导致异常结果出现。
问题三、本次结果异常到底是哪种原因？
通过跟踪患者的检测信息，找到了造成假阳性结果的关键原因，即患者的IgM型类风湿因子浓度极高，且部分自身免疫性抗体也为阳性且有相当的滴度。
4.如何有效规避干扰因素造成的酶免法检测结果异常？
在实验室现有的条件下，为了减少假阳性产生的几率，可以根据实情采取以下措施。
1.制定严格的实验室内操作规程，但凡OD值较低，或特殊病人如自身免疫病患者均需复查结果。
2.做好标本的前处理，尽量使用真空采血管，离心充分（天气较冷时，血液标本先放37℃水浴１~２ｈ），无溶血、脂血、纤维蛋白丝。
3.选择公认的、质量较好的试剂，且不同批号试剂不混用。
4.做好仪器设备的日常保养和定期校准。
5.设定适合自己实验室的“灰区”，对处于灰区的标本加强复查。同时密切结合其他临床资料和实验室结果，必要时随访。
6.使用自带阴、阳性标准品和合适的弱阳性质控物进行室内质控。
7.标本量过大时，可以分批次错时操作，确保温育时间准确。
8.有条件的实验室可以开展中和试验。
检以求真，验以求实，但凡精准检验，均需严谨的工作态度及丰富的专业知识做支撑。
来源：德安实验诊断
编辑：任里程审校：小冉预览时标签不可点收录于合集#个上一篇下一篇